Resumo O objetivo do presente estudo foi detectar Cercopithifilaria bainae e outros patógenos transmitidos por carrapatos e realizar a caracterização molecular do carrapato Rhipicephalus sanguineus s.l. coletado em cães. Carrapatos (n = 432, incluindo 8 larvas, 59 ninfas e 365 adultos) foram amostrados de cães domiciliados (n = 73) residentes no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul (centro-oeste do Brasil). Todos os carrapatos foram identificados morfologicamente como R. sanguineus. O DNA genômico foi extraído em pools (três a cinco carrapatos por animal), seguido pela definição de haplótipos (com base no gene 16S rRNA) e pela investigação de patógenos (Cercopithifilaria sp., Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis, Babesia vogeli e Rickettsia spp.). Os espécimes coletados foram identificados como haplótipos A e B de R. sanguineus. Foram detectados DNA de Cercopithifilaria bainae (43,83%; 32/73), Ehrlichia canis (24,65%; 18/73), Anaplasma platys (19,17%; 14/73) e Hepatozoon canis (5,47%; 4/73). A identidade dos patógenos foi confirmada por análise de sequência de DNA. O presente estudo confirma a circulação dos haplótipos A e B de R. sanguineus no estado de Mato Grosso do Sul e sua importância como vetor de vários patógenos de interesse veterinário. Finalmente, este é o primeiro relato de C. bainae em carrapatos na região centro-oeste do Brasil.

Abstract The aim of the present study was to detect Cercopithifilaria bainae and other tick-borne pathogens and to perform molecular characterization of the tick Rhipicephalus sanguineus s.l. collected from dogs. Ticks (n = 432, including 8 larvae, 59 nymphs, and 365 adults) were sampled from domiciled dogs (n = 73) living in Campo Grande, Mato Grosso do Sul (Midwest Brazil). All ticks were morphologically identified as R. sanguineus. Genomic DNA was extracted in pools (three to five ticks per animal) and was used for definition of R. sanguineus haplotypes (based on 16S rRNA analysis) and pathogen identification (Cercopithifilaria sp., Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis, Babesia vogeli and Rickettsia spp.). Rhipicephal us sanguineus specimens were identified as haplotypes A and B. DNA of Cercopithifilaria bainae (43.83%; 32/73), Ehrlichia canis (24.65%; 18/73), Anaplasma platys (19.17%; 14/73), and Hepatozoon canis (5.47%; 4/73) was detected. The identity of pathogens was confirmed by DNA sequence analysis. The present study confirms the presence of haplotypes A and B of R. sanguineus in the state of Mato Grosso do Sul and its importance as a vector of several pathogens of veterinary concern. Finally, this is the first report to identify C. bainae in ticks in the Midwestern region of Brazil.

Resumo A tripanossomíase causada por Trypanosoma evansi pode acometer gravemente os animais domésticos e selvagens. Este artigo relata um surto de tripanossomíase canina em uma fazenda na região do Pantanal, Brasil. Na fazenda havia 38 cães, 20 dos quais morreram antes de receber cuidados veterinários. Os 18 cães restantes foram submetidos a anamnese, exame clínico, avaliação hematológica e bioquímica. Esfregaços de sangue e análise da PCR foram realizados para o diagnóstico. Os protocolos de tratamento foram utilizados de acordo com a recuperação clínica ou cura parasitológica dos cães, utilizando diaceturato de diminazeno, cloreto de isometamídio ou sulfato de quinapiramina. A avaliação parasitológica pós-tratamento foi realizada pela técnica de microhematócrito. 7/18 cães foram PCR positivos para T. evansi (confirmado por sequenciamento). Os achados clínicos encontrados, foram consistentes com os estágios agudo e crônico da doença em cães. Todos os cães infectados exibiram pelo menos um sinal clínico da doença. Os achados hematológicos foram compatíveis com a tripanossomíase, destacando a anemia microcítica hipocrômica como principal consequência. Nenhum protocolo de tratamento foi totalmente eficaz e o uso prolongado de diaceturato de diminazeno causou a morte de um animal. A tripanossomíase pode causar altas taxas de morbidade e mortalidade em cães e dificultar o estabelecimento de um protocolo terapêutico eficaz e seguro.

Abstract Trypanosomiasis caused by Trypanosoma evansi can seriously affect both domestic and wild animals. This article reports on an outbreak of canine trypanosomiasis on a farm in the Pantanal region of Brazil. The farm had 38 dogs, 20 of which died before receiving veterinary care. The remaining 18 dogs were underwent anamnesisn, clinical examination, hematological and biochemical evaluations. Blood smears and PCR analysis were performed for the diagnosis. The treatment protocols used according to the clinical recovery or parasitological cure of the dogs, using diminazene diaceturate, isometamidium chloride or quinapyramine sulfate. Post-treatment parasitological evaluation was performed by the microhematocrit technique. 7/18 dogs were PCR positive for T. evansi (confirmed by sequencing). There was clinical findings, which were consistent with both the acute and chronic stages of the disease in dogs. The infected dogs all exhibited at least one clinical sign of the disease. The hematological findings were compatible with trypanosomiasis, highlighting the hypochromic microcytic anemia as the main outcome. No treatment protocol was fully effective and the prolonged use of diminazene diaceturate caused the death of an animal. The trypanosomiasis can cause high rates of morbidity and mortality in dogs and difficulty in establishment an effective and safe therapeutic protocol.

Resumo Enterocytozoon bieneusi é um patógeno intestinal oportunista que infecta humanos e uma variedade de animais em todo o mundo. O objetivo no presente estudo foi investigar a ocorrência de E. bieneusi em uma população de gatos domésticos em Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil. Sessenta amostras fecais de gatos diarréicos foram submetidas a reação em cadeia da polimerase (PCR) e os produtos de amplificação foram sequenciados para identificação molecular. E. bieneusi foi detectado em duas amostras (3,3%), ambos identificados como genótipo D. Esse genótipo tem sido relatado em animais e humanos e é considerado um genótipo zoonótico. Nossos resultados representam a primeira descrição de E. bieneusi em gatos domésticos no Brasil, reforçando a importância desse agente como fonte de infecção para animais e humanos.

Abstract Enterocytozoon bieneusi is an opportunistic intestinal pathogen that infects humans and a wide variety of animals worldwide. Our aim in this study was to investigate the occurrence of E. bieneusi in a domestic cat population in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil. Sixty fecal samples from diarrheic cats were subjected to polymerase chain reaction (PCR) and the amplicons were sequenced for identification. E. bieneusi was detected in two samples (3.3%), both identified as genotype D. This genotype has already been reported in animals and humans and is considered a zoonotic genotype. Our findings represent the first report of E. bieneusi in domestic cats in Brazil, reinforcing the importance of identifying this agent as a source of infection in animals and humans.

Abstract This study investigated the presence of generic and verotoxin-producing E. coli as well as enumerated faecal coliforms in 30 beef carcasses in different parts of the slaughter process (after skinning, washing and cooling) at each of three slaughterhouses of the state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Among the total number of carcasses examined (n = 90), 39 (43.3%) had generic E. coli. Among the 270 samples analysed, 25 (9.3%) were positive after skinning, 14 (5.2%) were positive after washing and nine (3.3%) were positive after cooling. The majority of isolates of E. coli was collected from samples after skinning, which is considered a critical point of the microbial contamination of carcasses. However, the highest concentration of faecal coliforms was found after the washing step. The cooling step proved to be important to reducing the amount of hygiene-indicator microorganisms. The E. coli isolates had no stx1 or stx2 genes associated with virulence.

Resumo Trypanosoma (Duttonella) vivax é responsável por consideráveis perdas econômicas na bovinocultura. Estas perdas estão relacionados à morbidade, mortalidade, problemas reprodutivos e declínio na produção. Sabe-se que os sinais clínicos apresentados em infecções por este protozoário se assemelha a outras hemoparasitoses, dificultando muitas vezes o diagnóstico. Portanto, objetivou-se com este estudo detectar a ocorrência de T. (D.) vivax em bovinos leiteiros no município de São Miguel Aleixo, Estado de Sergipe, Brasil. Para tanto, amostras de sangue (n = 15) foram coletadas e avaliadas através de métodos parasitológicos e moleculares. Do total das amostras analisadas, 34% (5/15) foram positivas no esfregaço sanguíneo, 60% (9/15) pelo método do Buffy Coat, enquanto na biologia molecular 80% (12/15) amplificaram um fragmento de DNA (659 pb) compatível com T. (D.) vivax (GenBank). Em conclusão a presença de T. (D.) vivax nos rebanhos bovinos caracteriza-se como um problema para os pecuaristas, como também para o diagnóstico, uma vez que essa tripanossomíase apresenta evolução semelhante a outras hemoparasitoses. Ademais, este é o primeiro relato de infecção por T. (D.) vivax em bovinos do estado de Sergipe, nordeste do Brasil.

Abstract Trypanosoma (Duttonella) vivax is an important cause of economic losses among feedlot cattle. These losses are related to the morbidity, mortality, reproductive issues and decreased production. It is known that the clinical signs observed in infections by this protozoon are similar to other hemoparasitosis, which difficult the diagnosis. Therefore, the aim of this study was to detect and molecularly characterize an outbreak of trypanosomiasis caused by T. (D.) vivax in dairy cattle in the municipality of São Miguel Aleixo, state of Sergipe, Brazil. Blood samples from cattle (n = 15) presenting clinical signs compatible with trypanosomiasis were collected and parasitological and molecular evaluated. Among the samples analyzed, 34% (5/15) were positive from blood smears, 60% (9/15) from the buffy coat method and 80% (12/15) from the molecular method. The DNA sequence obtained (659 bp) showed 99% similarity to T. (D.) vivax sequences that are available in the GenBank database. The presence of this protozoon in cattle herds is a problem for producers. Diagnosing trypanosomiasis is problematic because its evolution is similar to that of other parasitic blood diseases. In addition, this is the first report of infection by T. (D.) vivax in cattle in the state of Sergipe, northeastern Brazil.

RESUMO: Leishmaniose visceral (LV) é causada pelo protozoário Leishmania infantum . A transmissão deste parasito para hospedeiros é principalmente vetorial. No entanto, rotas alternativas de infecção têm sido investigadas, especialmente em áreas onde o vetor biológico está ausente. O período exato de infecção e se a transmissão in utero ocorre ainda não está totalmente elucidada. Este estudo demonstra uma evidência molecular da transmissão vertical de L. infantum de uma cadela prenhe para o embrião. As amostras (vulva, vagina, cérvix, corpo do útero, corno do útero e ovários) de uma fêmea naturalmente infectada por L. infantum e de seu embrião foram analisados molecularmente por meio de qPCR e cPCR, seguido de sequenciamento de DNA. A estimativa da idade gestacional foi de 23±1 dia. Na qPCR, a presença de DNA de L. infantum foi detectado em todas as amostras (n=7) analisadas, incluindo o embrião. No entanto, na PCR convencional, apenas quatro amostras (vagina, cérvix, corpo do útero e embrião) foram positivas. Este estudo demonstrou que a transmissão de L. infantum de uma cadela prenhe para o embrião pode ocorrer nos primeiros dias de prenhez. Em conclusão, de acordo com o conhecimento dos autores, este é o primeiro relatório evidenciando infecção de embrião canino por L. infantum.

ABSTRACT: Visceral leishmaniasis (VL) is caused by the protozoon Leishmania infantum . Transmission of this parasite to hosts occurs mainly through the bite of infected sand flies. However, alternative infection routes have been hypothesized, especially in areas where the biological vector is absent. The exact time of infection and whether in utero transmission occurs have still not been fully elucidated. This report demonstrates molecular evidence of vertical transmission of L. infantum from a pregnant dog to the embryo. Samples (e.g. vulva, vagina, cervix, uterine body, uterine horn and ovaries) from a female naturally infected by L. infantum and from her embryo were molecularly analyzed by means of qPCR and cPCR followed by DNA sequencing. The gestational age was estimated to be 23±1 day. Through qPCR, the presence of L. infantum DNA was detected in all the samples analyzed (n=7), including the embryo, conversely through cPCR, only four samples (vagina, cervix, uterine body and embryo) were positive. This study demonstrated that transmission of L. infantum from a pregnant dog to the embryo might occur in the early days of pregnancy. In conclusion, this is the first report showing L. infantum infecting a canine embryo.

RESUMO: Considerando a falta de estudos sobre lesões nos órgãos genitais de cadelas naturalmente infectadas por Leishmania infantum , o objetivo do presente estudo foi investigar a correlação entre reação inflamatória crônica, imunomarcação e carga parasitária, no sistema genital. Dez animais foram fornecidos pelo Departamento de Controle de Vetores e Vigilância Animal do município de Caruaru, Estado de Pernambuco, Brasil. Fragmentos de vulva, vagina, cérvix, corpo do útero, corno do útero e ovários foram avaliados por descrição histopatológica, imuno-histoquímica (IHQ) e detecção de DNA de formas amastigotas por qPCR. A relação entre IHQ e infiltrado inflamatório crônico relacionado com L. infantum foi observada apenas na vulva e vagina, enquanto as mesmas reações sem imunomarcação foram observadas em todos os órgãos, exceto nos ovários. DNA de L. infantum foi detectado em todos os órgãos do sistema genital, porém, sem diferença de carga parasitária entre eles. Não houve correlação entre a carga parasitária e lesões inflamatórias nos órgãos avaliados, com exceção do corpo do útero, em que foi encontrada uma correlação inversa. Em conclusão, a vulva e a vagina foram os principais locais de lesões e imunomarcação para formas amastigotas L. infantum no sistema genital de cadelas. A carga parasitária não influenciou a intensidade das lesões nos órgãos avaliados.

ABSTRACT: The aim of the present study was to investigate the correlations among chronic inflammatory reaction, immunostaining and parasite load in the genital system of female dogs naturally infected with Leishmania infantum . Animals (n = 10) used in this study were from the Department of Vector Control and Animal Surveillance of the municipality of Caruaru, state of Pernambuco, Brazil. Fragments of the vulva, vagina, cervix, uterine body, uterine horns and ovaries were submitted to histopathological analysis, immunohistochemistry (IHC) and DNA detection of amastigotes by qPCR. Correlations were found between the IHC findings and chronic inflammatory infiltrate related to L. Infantum only in the vulva and vagina; whereas, the same inflammatory reactions without immunostaining were observed in all organs, except the ovaries. L. Infantum DNA was detected in all organs of genital system, with no difference in parasite load observed among the different organs. No correlation was reported between parasite load and inflammatory lesions in the organs evaluated, except for the uterine body, in which an inverse correlation was detected. In conclusion, the vulva and vagina were the major sites of lesions and immunostaining for L. Infantum amastigotes in the genital system of female dogs. Moreover, parasite load exerted no influence on the intensity of the lesions in the organs evaluated.

Resumo Micoplasmas hemotrópicos de cães, como Mycoplasma haemocanis, já foram descritos em todo o mundo. Recentemente, esses patógenos têm sido apontados como causadores de zoonoses. É sabido que a transmissão pode ocorrer devido à ação de artrópodes sugadores de sangue (carrapatos, pulgas), transfusão sanguínea e/ou fômites contaminados e por via transplacentária. No Brasil, Mycoplasma haemocanis está presente em praticamente todas as regiões, e o carrapato Rhipicephalus sanguineus sensu lato é suspeito como principal vetor. No município de Campo Grande, Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil não existem muitas informações acerca de infecções de cães por M. haemocanis, assim como quais são os principais aspectos epidemiológicos associados a este patógeno. Assim, o objetivo, no presente estudo, foi determinar a ocorrência de M. haemocanis em cães infestados por carrapatos e analisar possíveis associações com alguns fatores epidemiológicos. A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e o sequenciamento de DNA foram utilizados para analisar amostras de sangue de cães (n = 94). DNA de M. haemocanis foi identificado em quatro amostras. Não foram observadas associações significativas com qualquer parâmetro epidemiológico analisado. No entanto, os resultados deste estudo confirmam que esse patógeno está circulando na região e deve ser considerado no diagnóstico diferencial de causas de anemia em cães.

Abstract Hemotropic mycoplasmas in dogs, such as Mycoplasma haemocanis, have been described worldwide. Recently, these pathogens have been reported to be causative agent of zoonosis. It is known that its transmission may occur through the action of blood-sucking arthropods (e.g. ticks or fleas), through blood transfusion, contaminated fomites and/or transplacentally. In Brazil, M. haemocanis is present in practically all regions and the tick Rhipicephalus sanguineus sensu lato is suspected the main vector. In the municipality of Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, there is little information about infection of dogs by M. haemocanis, or on the main epidemiological features associated with it. Thus, the aim of the present study was to determine the occurrence of M. haemocanis among dogs infested by ticks and to assess possible associations with some epidemiological factors. The polymerase chain reaction (PCR) and DNA sequencing were used to analyze dog blood samples (n = 94). DNA from M. haemocanis was detected in four samples. No significant associations were observed with any epidemiological parameter analyzed here. However, the results from this study confirm that this pathogen is circulating in this region and should be considered in the differential diagnosis of diseases among anemic dogs.

RESUMO: A Leishmaniose Visceral Canina é uma importante enfermidade causada pelo protozoário Leishmania infantum que afeta diversos órgãos e sistemas, incluindo o trato genital. No entanto, o tropismo da L. infantum pelo sistema genital masculino e a correlação entre carga parasitária, detecção imunohistoquímica e alterações estruturais nesses órgãos ainda é uma questão controversa. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar essa correlação em órgãos genitais de cães naturalmente infectados por L. infantum. Para tal, amostras de testículos, epidídimos, próstata, glande, prepúcio e escroto foram coletadas de 19 cães adultos positivos. Lesões microscópicas associadas com imunomarcação de formas amastigotas do parasito foram observadas nos testículos (5,2%), epidídimos (2,6%), prepúcio (5,2%) e escroto (5,2%). Por outro lado, alterações estruturais sem imunomarcação foram observadas em todos os órgãos. Além disso, o DNA de L. infantum foi encontrado em todos os órgãos com maior carga parasitária nos testículos, epidídimos e próstata. Curiosamente, os testículos apresentaram a maior carga parasitária, porém apresentaram o menor grau de lesões inflamatórias. Essas lesões inflamatórias foram observadas em todos os órgãos do sistema reprodutor de cães com L. infantum. Entretanto, não houve correlação entre carga parasitária e lesões inflamatórias nestes órgãos.

ABSTRACT: Canine visceral leishmaniasisis an important disease caused by the protozoon Leishmania infantum which affects several organs and systems, including the genital tract. The L. infantum tropism to the male genital system and correlation among parasite load, immunohistochemistry detection and structural changes in these organs is controversy. Therefore, the aim of this study was to evaluate this correlation in the genital organs of the male dogs naturally infected with L. infantum. Samples from testicles, epididymis, prostate, glans penis, prepuce and scrotum were collected from 19 positive adult dogs. Structural changes were observed in the testicles (5.2%), epididymis (2.6%), prepuce (5.2%) and scrotum (5.2%) of the samples positive at immunohistochemistry examination. Conversely, similar structural changes were observed in all tissues negative at immunohistochemistry analysis. Moreover, L. infantum DNA was detected in all organs with the highest parasite load found in testicles, epididymis, and prostate gland. , Testicles had the highest parasite load but the lowest number of inflammatory lesions. These inflammatory lesions were observed in all organs of reproductive system of dogs; however, no correlation was observed between the parasite load and inflammatory lesions of dogs naturally infected with L. infantum.

O objetivo deste estudo foi identificar a frequência e espécies de Hepatozoon infectando cães no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil. Uma amostragem de 165 animais foi utilizada e, por meio do uso de ferramentas moleculares, a espécie Hepatozoon canis foi identificada em 3,63% dos animais. Mais estudos são necessários para identificar a relevância clínica e os principais vetores envolvidos na transmissão desse protozoário na região.

The aim of this study was to investigate the occurrence of Hepatozoon species infecting dogs in the municipality of Campo Grande, Mato Grosso do Sul (MS), Brazil, using blood samples (n = 165) drawn from dogs. The species Hepatozoon caniswas identified in 3.63% of the tested animals using molecular tools. Further studies are needed to determine the clinical relevance of this infection and the main arthropod vectors involved in its transmission.

O objetivo do trabalho foi avaliar a eficácia de tratamentos fitoterápicos, homeopáticos e alopáticos contra ecto e endoparasitas na recria de novilhas, em dois ciclos experimentais subsequentes de 318 e 313 dias. Tratamentos: CN - controle negativo - não tratado; tratamento HH - tratado com homeopático Homeo bovis Parasitário®; tratamento CP – controle positivo – tratado com moxidectina 10%® e uma formulação acaricida contendo cypermetrina, clorpirifós e butóxido de piperonila®; tratamento HF - tratado com homeopático Fator C&MC® e tratamento FN - tratados com torta de neem® e com óleo de neem®. A contagem de ovos nas fezes (OPG), a infestação por Haematobia irritans, Rhipicephalus (Boophilus) microplus e pesagem dos animais foram realizadas em intervalos de 28 dias. No primeiro ciclo foi coletado sangue para avaliar a resposta imume. A infestação por mosca-dos-chifres não foi influenciada por nenhum dos tratamentos (P>0,05). Nos dois ciclos o número médio de carrapatos foi baixo e apenas no primeiro foi menor (P>0.05) no tratamento CP em relação aos demais. A média de OPG no tratamento CP foi mais baixa que nos demais tratamentos nos dois ciclos experimentais (P<0,05). Não houve efeito de tratamentos na resposta imune. Os animais do tratamento CP ganharam entre 22 a 30 kg de peso vivo a mais (P<0,05) que os não tratados ou tratados com medicamentos alternativos.

The aim of this study was to evaluate the efficacy of herbal, homeopathic and allopathic treatments for parasites in beef heifers during two experimental cycles of 318 and 313 days. Treatments: NC - negative control (untreated); HH - treated with homeopathic preparation Homeo bovis Parasitário®; PC - (positive control) - treated with 10% moxidectina® and an acaricide formulation of cypermethrin, chlorpyrifos and piperonyl butoxide®; HF – treated with homeopathic preparation Fator C&MC®; and FN - treated with neem cake (torta de neem®) and with neem oil (óleo de neem®). Parasite egg count (EPG), horn fly (Haematobia irritans) and tick (Rhipicephalus (Boophilus) microplus) assessment and animal weighting were performed at 28-day intervals. Blood samples were collected at the first cycle to assess the immune response. Horn fly infestation was not affected by any treatment (P>0.05). The mean number of ticks, which was low in both cycles, was lower (P<0.05) in the first cycle in animals that received PC treatment. In both experimental cycles, the mean EPG of the PC-treated animals was lower (P<0.05) than the animals receiving other treatments. Treatments had no effect on the immune response (P>0.05). The animals treated with allopathic drugs were 22 to 30 kg heavier (P<0.05) than untreated animals or animals treated with alternative drugs.

O objetivo do presente estudo foi quantificar a carga parasitária deLeishmania infantum em cães pela técnica de PCR em tempo-real (qPCR). Amostras de medula óssea, linfonodo e baço foram obtidos de 24 cães sorologicamente positivos para L. infantum que foram submetidos à eutanásia pelo serviço de vigilância oficial. Segundo os sinais clínicos, os animais foram classificados em assintomáticos ou sintomáticos. Após extração de DNA, as amostras foram submetidas à qPCR para detecção e quantificação de DNA de L. infantum. Dos 24 cães, 12,5% (3/24) foram classificados como assintomáticos e 87,5% (21/24) como sintomáticos. A PCR em tempo real detectou DNA de L. infantum em 100% dos animais, em pelo menos uma amostra biológica. Considerando cada órgão isoladamente, foi observada uma positividade de 100% em medula óssea e linfonodo, já nas amostras de baço 95,9% (23/24) foram positivas. Não foi observada diferença estatística entre a quantidade média geral de DNA entre as diferentes amostras biológicas (P = 0,518). Considerando os diferentes grupos clínicos, a carga parasitária média geral variou significantemente (P = 0,022). De acordo com os resultados obtidos não foi possível eleger a mais apropriada amostra biológica para o diagnóstico, baseado apenas na carga parasitária. Portanto, outras características como a conveniência e a facilidade de obtenção da amostra devem ser consideradas.

The aim of the present study was to quantify the parasite load ofLeishmania infantum in dogs using real-time PCR (qPCR). Bone marrow, lymph node and spleen samples were taken from 24 dogs serologically positive for L. infantum that had been put down by the official epidemiological surveillance service. According to the clinical signs the dogs were classified as asymptomatic or symptomatic. After DNA extraction, the samples were subjected to qPCR to detect and quantify L. infantum DNA. Out of the 24 dogs, 12.5% (3/24) were classified as asymptomatic and 87.5% (21/24) as symptomatic. Real-time PCR detected L. infantum DNA in all the animals, in at least one biological sample. In particular, 100% of bone marrow and lymph node scored positive, whereas in spleen, the presence of DNA was detected in 95.9% (23/24). In addition, out of 24 animals, 15 were microscopically positive to amastigote forms of L. infantum in bone marrow. No statistical significant difference was found in the overall mean quantity of DNA among the different biological samples (P = 0.518). Considering each organ separately, there was 100% positivity in bone marrow and lymph nodes, while among the spleen samples, 95.9% (23/24) were positive. Regarding the different clinical groups, the overall mean parasite load varied significantly (P = 0.022). According to the results obtained, it was not possible determine which biological sample was most suitable tissue for the diagnosis, based only on the parasite load. Therefore, other characteristics such as convenience and easily of obtaining samples should be taken into consideration.

A importância do cão como reservatório de L. infantum chagasi no meio urbano tem estimulado a realização de inúmeros trabalhos de avaliação de técnicas de diagnóstico, uma vez que este procedimento, quando realizado corretamente, torna-se um importante passo na prevenção da doença em humanos. Dentre os métodos de diagnóstico, as técnicas moleculares têm adquirido destaque. Objetivou-se neste trabalho verificar o desempenho da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e da PCR em tempo real (qPCR) para diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC) utilizando diferentes amostras biológicas. Para tanto foram utilizados 35 cães provenientes de uma área endêmica para LVC, onde foram utilizados para o diagnóstico molecular, aspirado de medula óssea, fragmentos de linfonodo e baço. Neste estudo a qPCR foi capaz de detectar um maior número de animais positivos quando comparada com a PCR. Já entre as diferentes amostras biológicas utilizadas não foi observada diferença significativa na detecção de DNA de L. infantumchagasi por meio da PCR e qPCR. Mesmo assim, considerando a facilidade de obtenção, o linfonodo pode ser considerada como a melhor amostra para diagnóstico molecular da infecção por L. infantum chagasi.

The importance of dogs as a reservoir for Leishmania infantumchagasi in urban environments has stimulated numerous studies assessing diagnostic techniques. When performed properly, such procedures are an important step in preventing leishmaniasis in humans. Molecular methods have become prominent for this purpose. The aim of the present study was to determine the performance of the polymerase chain reaction (PCR) and real-time PCR (qPCR) for diagnosing of canine visceral leishmaniasis (CVL) using different biological samples. For this, 35 dogs from an area endemic for CVL were used. Bone marrow aspirate and lymph node and spleen fragments from these dogs were used for the molecular diagnosis. In the present study, qPCR was able to detect a greater number of positive animals than seen with PCR. Among the different biological samples used, there was no significant difference in L. infantumchagasi DNA detection between PCR and qPCR. However, considering that lymph nodes are easy to acquire, these can be considered to be the best samples for making molecular diagnoses of L. infantum chagasi infection.